• <td id="amkoc"></td>

          <small id="amkoc"><tbody id="amkoc"></tbody></small>
          <small id="amkoc"><dl id="amkoc"><small id="amkoc"></small></dl></small>
          

              1. <i id="amkoc"><ins id="amkoc"></ins></i>

                少妇被精子灌满的视频_欧美日韩免费在线观看_国产av午夜_国产盗摄20女厕嘘嘘大神级_来一水AV@lysav

                您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
                全國(guó)服務(wù)熱線(xiàn):13585831301
                上海莼試生物技術(shù)有限公司
                您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 新聞動(dòng)態(tài) > 常遇到菌落PCR試劑盒問(wèn)題疑難解答

                常遇到菌落PCR試劑盒問(wèn)題疑難解答

                瀏覽次數(shù):722發(fā)布日期:2021-03-19
                   菌落PCR試劑盒是篩選重組子的有效方法,可以使質(zhì)粒鑒定過(guò)程從兩天縮短到幾小時(shí)。但由于它直接以E.coli菌落為PCR而菌落中常常含有未進(jìn)入細(xì)菌的、來(lái)源于連接反應(yīng)的載體DNA和插入片段,所以十分容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。
                  菌落PCR試劑盒常遇到的疑難解答:
                  Q:樣品沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物而陽(yáng)性對(duì)照有產(chǎn)物出現(xiàn)。
                  A:可能是樣品DNA溶液中含有的細(xì)胞裂解物抑制了PCR擴(kuò)增。建議將樣品DNA溶液用水稀釋5-100倍后再擴(kuò)增(兩個(gè)梯度)。
                  Q:樣品和陽(yáng)性對(duì)照都沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)。
                  A:重新設(shè)計(jì)PCR反應(yīng)參數(shù)或引物。
                  Q:陽(yáng)性對(duì)照有大小不同的兩條擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)。
                  A:如果用戶(hù)自備的引物一條識(shí)別載體,一條識(shí)別插入片段,模板又是連接反應(yīng)液,則出現(xiàn)此情況屬于正常,因?yàn)閮煞N插入方向的DNA在連接反應(yīng)液里面都存在。
                  Q:菌落PCR試劑盒陰性對(duì)照有擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)。
                  A:如果是引物二聚體,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。如果片段跟陽(yáng)性對(duì)照一樣,可能有污染,其他陽(yáng)性結(jié)果也可能是污染引起,建議找到污染原因后再繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。
                  Q:一個(gè)普通菌落中一般有多少殘留的未轉(zhuǎn)化的DNA?
                  A:如果使用100ng的插入片段進(jìn)行連接反應(yīng),用1/10的連接反應(yīng)液進(jìn)行轉(zhuǎn)化,再用1/10的轉(zhuǎn)化菌液涂盤(pán),有一半插入片段進(jìn)入細(xì)菌計(jì)算,則有0.5ng的插入DNA片段游離在細(xì)胞外,分布培養(yǎng)皿表面。一個(gè)培養(yǎng)皿的表面積一般為55cm2,一個(gè)直徑為5mm的菌落(面積約0.2mm2)則平均可能含有3pg左右的游離狀的插入DNA片段,如果使用插入片段專(zhuān)一性的PCR引物,則足夠在PCR反應(yīng)中產(chǎn)生假陽(yáng)性。
                Contact Us
                • 聯(lián)系QQ:3004972506
                • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
                • 傳真:86-021-60443211
                • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

                掃一掃  微信咨詢(xún)

                ©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問(wèn)量:106296 管理登陸

                少妇被精子灌满的视频_欧美日韩免费在线观看_国产av午夜_国产盗摄20女厕嘘嘘大神级_来一水AV@lysav
              2. <td id="amkoc"></td>

                      <small id="amkoc"><tbody id="amkoc"></tbody></small>
                      <small id="amkoc"><dl id="amkoc"><small id="amkoc"></small></dl></small>
                      

                          1. <i id="amkoc"><ins id="amkoc"></ins></i>
                            吴堡县| 麟游县| 庆元县| 积石山| 定安县| 阳江市| 小金县| 黑龙江省| 崇文区| 科技| 昌吉市| 都昌县| 汝阳县| 青铜峡市| 潼关县| 克什克腾旗| 河西区| 三江| 龙井市| 民勤县| 顺平县| 乌鲁木齐市| 武强县| 敦煌市| 水富县| 祁东县| 夏河县| 镇江市| 施秉县| 道真| 乌鲁木齐市| 满城县| 霍邱县| 苍梧县| 扎囊县| 祁东县| 寿光市| 西林县| 莒南县| 城步| 文水县|